Мы используем технологию cookie для понимания того, как вы пользуетесь нашим сайтом. Под этим подразумевается персонализированный контент и реклама. Для того, чтобы узнать больше - нажмите сюда. Пользуясь данным сайтом вы подтверждаете согласие с нашей политикой. Политика cookie.
Please note that the LabMedica website is also available in a complete English version
Разделы Партнеры Информация LinkXpress
Вход
Реклама на сайте
GLOBETECH PUBLISHING LLC

Мобильное Приложение




Для диагностики болезни Шагаса улучшена техника выделения ДНК

Редакция HospiMedica - Россия
Опубликовано 13 Feb 2019
Print article
Trypanosoma cruzi в тонких мазках крови, окрашенных по Гимзе (фото любезно предоставлено Центрами по контролю и профилактике заболеваний).
Trypanosoma cruzi в тонких мазках крови, окрашенных по Гимзе (фото любезно предоставлено Центрами по контролю и профилактике заболеваний).
Болезнь Шагаса, вызываемая простейшим паразитом Trypanosoma cruzi, является эндемической во многих частях Северной и Южной Америки, где ей инфицировано от шести до семи миллионов человек. В острой фазе инфекции серологические реакции все еще могут быть отрицательными, но положительными на паразита при микроскопическом исследовании или при культивировании в специализированной среде.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) стала немаловажным и чувствительным диагностическим инструментом. Тест очень чувствителен для диагностики острой и врожденной формы болезни Шагаса. Обычная ПЦР имеет несколько недостатков, в первую очередь риск перекрестной контаминации. По этой причине в настоящее время более широко используется количественная ПЦР (кПЦР).

Ученые из Университета Каэтано Эредиа (Cayetano Heredia University, Лима, Перу) и их коллеги усовершенствовали и разработали более чувствительный метод извлечения ДНК паразита из образца сгустка крови для диагностики болезни Шагаса. Всего было проанализировано 265 парных образцов цельной крови с применением гуанидина (GEB) и образцов сгустка; 150 были взяты у серопозитивных пациентов с болезнью Шагаса. ДНК выделяли как из образцов цельной крови с гуанидином, используя ранее стандартизированную методологию, так и из образцов сгустка, используя недавно разработанную методологию, основанную на комбинировании метода FastPrep и стандартного метода экстракции GEB.

Образцы крови, смешанные с гуанидином/ЭДТА (GEB), подготавливали с использованием набора для матриц ПЦР High Pure PCR Template Preparation kit. Была выполнена дуплексная кПЦР, направленная на сателлитную последовательность ядерного генома T. cruzi и последовательность внутреннего контроля амплификации. Диагноз болезни Шагаса в образцах человека был основан на серологических исследованиях. Ферментно-связанные иммуносорбентные анализы (ELISA) проводились с использованием Chagatek Wiener Recombinante v3.0 ELISA. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) была проведена с использованием набора Chagas Polychaco. Также был выполнен вестерн-блоттинг.

Команда сообщила, что из 265 проанализированных образцов 150 были взяты у серопозитивных пациентов с болезнью Шагаса. Средняя концентрация ДНК в образцах сгустка была выше, чем в GEB-образцах. Из 150 образцов от Шагас-положительных индивидуумов по результатам серологии 47 образцов дали положительный результат при помощи кПЦР с ДНК, выделенной как с помощью GEB, так и сгустка крови, но дополнительные 13 образцов дали положительный результат только по ДНК, выделенной из сгустка. Серологически отрицательные образцы не дали положительных результатов при тестировании с помощью кПЦР. Согласованность между кПЦР с использованием ДНК из сгустка и ДНК ГЭБ составила 95,9%.

Авторы пришли к выводу, что их усовершенствованная методология обнаружения ДНК T. cruzi с использованием сгустка крови может улучшить раннюю диагностику и, следовательно, позволит оптимизировать лечение и прогноз для инфицированных людей, особенно с малой плотностью паразитов, присутствующих в крови. Исследование было опубликовано 11 января 2019 года в журнале PLOS Neglected Tropical Diseases.

Ссылки по теме:
Cayetano Heredia University


Print article
BIOHIT  Healthcare OY

Каналы

Химия

посмотреть канал
Новый анализ крови гарантирует практически мгновенную постановку диагноза сердечного приступа с использованием недавно открытого биомаркера белка (фото любезно предоставлено iStock).

Разработан новый анализ крови на инфаркт миокарда

Уровень сердечного миозин-связывающего белка C (cMyC) в крови после инфаркта миокарда повышается быстрее и в большей степени,... Читать дальше

Гематология

посмотреть канал
Жертвы с серьезными травмами, которые получают переливания единиц эритроцитарной массы, хранящихся в течение 22 дней или больше, могут столкнуться с повышенным риском смерти в течение 24 часов (фото любезно предоставлено службой патологии юго-западного Лондона /South West London Pathology/).

Переливание крови, бывшей длительное время на хранении, связано с неблагоприятными явлениями

Ведущей причиной смерти после тяжелой травмы является потеря крови. Жертвы с серьезными травмами, которые получают переливания... Читать дальше

Иммунология

посмотреть канал
Уникальный наконечник для пипетки, созданный на 3D-принтере, для проведения иммуноферментных анализов (фото любезно предоставлено Университетом Коннектикута).

Новая технология 3D-печати снижает стоимость иммуноферментного анализа

Традиционный иммуноферментный анализ (ИФА) проводят на планшетах с 96 микролунками; каждая лунка работает как отдельная испытательная... Читать дальше

Микробиология

посмотреть канал
Цифровая капельная ПЦР-система QX200 (фото любезно предоставлено Bio-Rad).

Олигобациллярная лепра может быть диагностирована с помощью цифрового ПЦР-анализа

Проказа, или болезнь Хансена, является хроническим бактериальным заболеванием, вызываемым Mycobacterium leprae.... Читать дальше

Патология

посмотреть канал
Портативное устройство MasSpec Pen, которое можно подключить к масс-спектрометру для диагностики рака яичников и других видов рака (фото любезно предоставлено Техасским университетом в Остине).

Устройство Masspec Pen одобрено для быстрой диагностики рака

Рак яичников является заболеванием c чрезвычайно высокой смертностью и пятой по значимости причиной всех связанных с раком... Читать дальше

Лаб. технология

посмотреть канал
Наноэлектронный анализ: клетки крови в напряженном состоянии могут выступать в качестве биомаркера хронической усталости (фото любезно предоставлено The Scientist).

Разработан биомаркерный тест, который поможет выявлять синдром хронической усталости

Миалгический энцефаломиелит, или синдром хронической усталости (МЭ/СХУ), является серьезным заболеванием, которое может затронуть... Читать дальше

Индустрия

посмотреть канал
По прогнозам специалистов, мировой рынок диагностики in vitro будет расти в период между 2017 и 2025 годами и к концу 2025 года достигнет почти 90 миллиардов долларов США (фото любезно предоставлено iStock).

К 2025 году мировой рынок диагностики in vitro достигнет 89 миллиардов долларов США

Мировой рынок диагностики in vitro был оценен в 55,00 миллиардов долларов США в 2016 году и, согласно прогнозам, будет расти... Читать дальше
Copyright © 2000-2019 Globetech Media. All rights reserved.