Мы используем технологию cookie для понимания того, как вы пользуетесь нашим сайтом. Под этим подразумевается персонализированный контент и реклама. Для того, чтобы узнать больше - нажмите сюда. Пользуясь данным сайтом вы подтверждаете согласие с нашей политикой. Политика cookie.
Please note that the LabMedica website is also available in a complete English version
Разделы Партнеры Информация LinkXpress
Вход
Реклама на сайте
GLOBETECH PUBLISHING LLC

Мобильное Приложение




Для диагностики болезни Шагаса улучшена техника выделения ДНК

Редакция HospiMedica - Россия
Опубликовано 13 Feb 2019
Print article
Trypanosoma cruzi в тонких мазках крови, окрашенных по Гимзе (фото любезно предоставлено Центрами по контролю и профилактике заболеваний).
Trypanosoma cruzi в тонких мазках крови, окрашенных по Гимзе (фото любезно предоставлено Центрами по контролю и профилактике заболеваний).
Болезнь Шагаса, вызываемая простейшим паразитом Trypanosoma cruzi, является эндемической во многих частях Северной и Южной Америки, где ей инфицировано от шести до семи миллионов человек. В острой фазе инфекции серологические реакции все еще могут быть отрицательными, но положительными на паразита при микроскопическом исследовании или при культивировании в специализированной среде.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) стала немаловажным и чувствительным диагностическим инструментом. Тест очень чувствителен для диагностики острой и врожденной формы болезни Шагаса. Обычная ПЦР имеет несколько недостатков, в первую очередь риск перекрестной контаминации. По этой причине в настоящее время более широко используется количественная ПЦР (кПЦР).

Ученые из Университета Каэтано Эредиа (Cayetano Heredia University, Лима, Перу) и их коллеги усовершенствовали и разработали более чувствительный метод извлечения ДНК паразита из образца сгустка крови для диагностики болезни Шагаса. Всего было проанализировано 265 парных образцов цельной крови с применением гуанидина (GEB) и образцов сгустка; 150 были взяты у серопозитивных пациентов с болезнью Шагаса. ДНК выделяли как из образцов цельной крови с гуанидином, используя ранее стандартизированную методологию, так и из образцов сгустка, используя недавно разработанную методологию, основанную на комбинировании метода FastPrep и стандартного метода экстракции GEB.

Образцы крови, смешанные с гуанидином/ЭДТА (GEB), подготавливали с использованием набора для матриц ПЦР High Pure PCR Template Preparation kit. Была выполнена дуплексная кПЦР, направленная на сателлитную последовательность ядерного генома T. cruzi и последовательность внутреннего контроля амплификации. Диагноз болезни Шагаса в образцах человека был основан на серологических исследованиях. Ферментно-связанные иммуносорбентные анализы (ELISA) проводились с использованием Chagatek Wiener Recombinante v3.0 ELISA. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) была проведена с использованием набора Chagas Polychaco. Также был выполнен вестерн-блоттинг.

Команда сообщила, что из 265 проанализированных образцов 150 были взяты у серопозитивных пациентов с болезнью Шагаса. Средняя концентрация ДНК в образцах сгустка была выше, чем в GEB-образцах. Из 150 образцов от Шагас-положительных индивидуумов по результатам серологии 47 образцов дали положительный результат при помощи кПЦР с ДНК, выделенной как с помощью GEB, так и сгустка крови, но дополнительные 13 образцов дали положительный результат только по ДНК, выделенной из сгустка. Серологически отрицательные образцы не дали положительных результатов при тестировании с помощью кПЦР. Согласованность между кПЦР с использованием ДНК из сгустка и ДНК ГЭБ составила 95,9%.

Авторы пришли к выводу, что их усовершенствованная методология обнаружения ДНК T. cruzi с использованием сгустка крови может улучшить раннюю диагностику и, следовательно, позволит оптимизировать лечение и прогноз для инфицированных людей, особенно с малой плотностью паразитов, присутствующих в крови. Исследование было опубликовано 11 января 2019 года в журнале PLOS Neglected Tropical Diseases.

Ссылки по теме:
Cayetano Heredia University


Print article

Каналы

Химия

посмотреть канал
Автоматизированная система DS2 ELISA (фото любезно предоставлено Dynex Technologies).

Условия хранения образцов влияют на уровни содержания альбумина и креатинина в моче

Было установлено, что умеренно повышенная экскреция альбумина с мочой, ранее известная как микроальбуминурия, является фактором... Читать дальше

Гематология

посмотреть канал
Жертвы с серьезными травмами, которые получают переливания единиц эритроцитарной массы, хранящихся в течение 22 дней или больше, могут столкнуться с повышенным риском смерти в течение 24 часов (фото любезно предоставлено службой патологии юго-западного Лондона /South West London Pathology/).

Переливание крови, бывшей длительное время на хранении, связано с неблагоприятными явлениями

Ведущей причиной смерти после тяжелой травмы является потеря крови. Жертвы с серьезными травмами, которые получают переливания... Читать дальше

Иммунология

посмотреть канал
ИФА-тест PicoAMH измеряет количество антимюллерового гормона (AMH) в крови (фото любезно предоставлено Ansh Labs).

Диагностический тест помогает определить менопаузальный статус

Менопауза - это период в жизни женщины, когда у нее прекращается менструальный цикл и она перестает быть фертильной.... Читать дальше

Микробиология

посмотреть канал
Цифровая капельная ПЦР-система QX200 (фото любезно предоставлено Bio-Rad).

Олигобациллярная лепра может быть диагностирована с помощью цифрового ПЦР-анализа

Проказа, или болезнь Хансена, является хроническим бактериальным заболеванием, вызываемым Mycobacterium leprae.... Читать дальше

Патология

посмотреть канал
Диаграмма эволюционных траекторий глиобластом IDH-WT, демонстрирующая типичный путь раннего онкогенеза, инициированного за несколько лет до первоначальной диагностики (фото любезно предоставлено Немецким онкологическим исследовательским центром German Cancer Research Center).

Мутации драйвера развития глиобластомы появляются задолго до постановки диагноза

Глиобластомы являются наиболее распространенной (раковой) первичной опухолью головного мозга у взрослых. В редких случаях... Читать дальше

Лаб. технология

посмотреть канал
Схематическое изображение чипа µLAS с двумя независимыми каналами, приводимыми в действие одинаковым давлением и напряжением. Каждый канал содержит область воронки, которая функционирует для разделения и концентрации ДНК (фото любезно предоставлено Университетом Лозанны).

Генетические методы позволяют быстро диагностировать болезнь Хантингтона

Люди с болезнью Хантингтона страдают от резких движений тела и снижения умственных способностей. Состояние обычно приводит... Читать дальше

Индустрия

посмотреть канал
По прогнозам специалистов, мировой рынок диагностики in vitro будет расти в период между 2017 и 2025 годами и к концу 2025 года достигнет почти 90 миллиардов долларов США (фото любезно предоставлено iStock).

К 2025 году мировой рынок диагностики in vitro достигнет 89 миллиардов долларов США

Мировой рынок диагностики in vitro был оценен в 55,00 миллиардов долларов США в 2016 году и, согласно прогнозам, будет расти... Читать дальше
Copyright © 2000-2019 Globetech Media. All rights reserved.