Мы используем технологию cookie для понимания того, как вы пользуетесь нашим сайтом. Под этим подразумевается персонализированный контент и реклама. Для того, чтобы узнать больше - нажмите сюда. Пользуясь данным сайтом вы подтверждаете согласие с нашей политикой. Политика cookie.
Разделы Партнеры Информация LinkXpress
Вход
Реклама на сайте
SIGMA ALDRICH CORP.

Изотермическая амплификация с формированием петель идентифицирует виды малярии

Редакция HospiMedica - Россия
Опубликовано 03 Sep 2018
Print article
Схема протокола для in situ LAMP для эритроцитов, инфицированных плазмодием, на гидрофильных пластинах из циклоолефинового сополимера (фото любезно предоставлено Национальным институтом прогрессивной промышленной науки и технологии).
Схема протокола для in situ LAMP для эритроцитов, инфицированных плазмодием, на гидрофильных пластинах из циклоолефинового сополимера (фото любезно предоставлено Национальным институтом прогрессивной промышленной науки и технологии).
Малярия - инфекционное заболевание, вызываемое различными видами плазмодия, пять из которых заражают людей. Поскольку малярия, вызванная P. falciparum, является наиболее серьезной и характеризуется высокой смертностью, точный и быстрый диагноз особенно важен для эффективного лечения.

Нынешний золотой стандарт для диагностики малярии - это микроскопическое исследование окрашенных по Гимзе мазков крови. Поскольку виды паразитов идентифицируются микроскопистами, которые вручную ищут зараженные паразитом эритроциты, в случае низкой паразитемии или смешанной инфекции может иметь место неверная диагностика из-за человеческой ошибки.

Ученые из Национального института прогрессивной промышленной науки и технологии (National institute of advanced industrial science and technology; Takamatsu, Япония) проводили in situ изотермическую амплификацию с формированием петель (Loop-Mediated Isothermal Amplification - LAMP) в инфицированных эритроцитах (iRBC) на обработанных гидрофильных пластинках, чтобы анализировать как можно больше iRBC на стекле. Идентификация малярийного паразита на клеточных уровнях с использованием in situ LAMP-анализа была завершена. Команда использовала свежие эритроциты здорового донора с типом крови O, которые были инфицированы P. falciparum, содержащим более 60% паразитов в кольцевой стадии, более 20% - в стадии позднего трофозоита и менее 20% - в стадии шизонта.

Суспензии эритроцитов, включающие культивированный Plasmodium falciparum, штамм 3D7, инфицированные эритроциты, диспергировали на поверхностях пластин из циклоолефинового сополимера (ЦОС), которые подвергались гидрофильной обработке реактивным ионным травлением с использованием системы SAMCO RIE (гидрофильная обработка), а затем оставались в покое в течение 10 минут, чтобы эритроциты распределились на поверхности пластины. В процессе промывки пластины средой RPMI 1640 монослои эритроцитов формировались почти на всей поверхности пластины. Затем пластина была высушена феном. Эритроциты фиксировались формалином с последующей пермеабилизацией при помощи Triton X-100. После этого была проведена амплификация рРНК гена P. falciparum с помощью реакции LAMP с дезоксиуридинтрифосфатом, меченным дигоксигенином (DIG) и конкретным набором праймеров. В результате возможно обнаружение инфицированных эритроцитов в виде флуоресцентно-позитивных клеток с анти-DIG-антителами, конъюгированными с флуоресцеином с использованием флуоресцентной микроскопии.

Авторы пришли к выводу, что их исследование показало потенциал in situ LAMP для идентификации видов плазмодия на уровне одиночных клеток на обработанных гидрофильных пластинах из циклоолефинового сополимера, что позволяет проводить высокочувствительный и точный диагноз малярии. Полученные результаты улучшат эффективность метода золотого стандарта для диагностики малярии. Исследование было опубликовано 19 июня 2018 года в журнале Malaria Journal.

Ссылки по теме:
Национальный институт прогрессивной промышленной науки и технологии


Print article

Каналы

Химия

посмотреть канал
Новое исследование показывает, что ожирение, которое влияет на печень, может сыграть определенную роль в развитии болезни Альцгеймера и деменции в отдаленном будущем (фото предоставлено Deposit Photos).

На риск развития болезни Альцгеймера влияет состояние печени и диета

Сниженные уровни плазмалогенов имеют связь с повышенным риском болезни Альцгеймера. Плазмалогены вырабатываются в печени... Читать дальше

Молекулярная диагностика

посмотреть канал
Тромбоз глубоких вен (фото предоставлено Wikimedia Commons).

Предложен быстрый метод диагностирования тромбоза глубоких вен

Простой анализ крови был предложен в качестве альтернативы довольно дорогостоящей и интенсивной ультразвуковой процедуре... Читать дальше

Гематология

посмотреть канал
Мазок крови показывает гетерогенность размера периферических эритроцитов, известную как анизоцитоз (фото любезно предоставлено доктором медицины Джей Парк (Jay Park)).

Гематологические параметры прогнозируют тяжесть острого панкреатита

Острый панкреатит (ОП) - острое воспаление паренхимы поджелудочной железы, вызванное активированными ферментами поджелудочной... Читать дальше

Иммунология

посмотреть канал
Ревматоидный артрит может вызвать ряд изнуряющих симптомов, включая боль и отек в суставах, усталость и депрессию (фото любезно предоставлено SPL).

Генетические сигнатуры и биомаркеры предсказывают возникновение ревматоидного артрита

Ревматоидный артрит характеризуется воспалением суставов, приводящим к разрушению кости и хряща. Поскольку структурное повреждение... Читать дальше

Патология

посмотреть канал
Набор для обратной транскрипции Sensiscript, использующий очень небольшое количество РНК, идеально подходит для случаев применения, требующих высокой чувствительности (фото любезно предоставлено Qiagen).

Определен новый белок-мишень для выявления рака толстой кишки

Колоректальный рак (КРР) является третьим наиболее часто диагностируемым онкологическим заболеванием и третьей ведущей причиной... Читать дальше

Лаб. технология

посмотреть канал
Гибридизация нуклеиновой кислоты на электрически реконфигурируемой сети из магнитных наночастиц с золотым покрытием позволяет обнаруживать микроРНК в крови (фото любезно предоставлено Университетом Нового Южного Уэльса).

Инструмент на основе магнитных наночастиц поможет обнаруживать микроРНК

Разработан метод на основе магнитных наночастиц для непосредственного обнаружения микроРНК в необработанных образцах цельной... Читать дальше

Индустрия

посмотреть канал
По прогнозам специалистов, глобальный рынок портативного коагулогического исследования будет расти частично благодаря растущему гериатрическому населению во всем мире (фото любезно предоставлено Shutterstock).

Глобальный рынок коагулогического исследования по месту лечения обусловлен увеличением численности гериатрического населения

По прогнозам специалистов, глобальный рынок портативного тестирования на коагуляцию будет расти с совокупными темпами годового... Читать дальше
Copyright © 2000-2018 Globetech Media. All rights reserved.