Мы используем технологию cookie для понимания того, как вы пользуетесь нашим сайтом. Под этим подразумевается персонализированный контент и реклама. Для того, чтобы узнать больше - нажмите сюда. Пользуясь данным сайтом вы подтверждаете согласие с нашей политикой. Политика cookie.
Разделы Партнеры Информация LinkXpress
Вход
Реклама на сайте
ALTO/MARKETING LIMITED

Изотермическая амплификация с формированием петель идентифицирует виды малярии

Редакция HospiMedica - Россия
Опубликовано 03 Sep 2018
Print article
Схема протокола для in situ LAMP для эритроцитов, инфицированных плазмодием, на гидрофильных пластинах из циклоолефинового сополимера (фото любезно предоставлено Национальным институтом прогрессивной промышленной науки и технологии).
Схема протокола для in situ LAMP для эритроцитов, инфицированных плазмодием, на гидрофильных пластинах из циклоолефинового сополимера (фото любезно предоставлено Национальным институтом прогрессивной промышленной науки и технологии).
Малярия - инфекционное заболевание, вызываемое различными видами плазмодия, пять из которых заражают людей. Поскольку малярия, вызванная P. falciparum, является наиболее серьезной и характеризуется высокой смертностью, точный и быстрый диагноз особенно важен для эффективного лечения.

Нынешний золотой стандарт для диагностики малярии - это микроскопическое исследование окрашенных по Гимзе мазков крови. Поскольку виды паразитов идентифицируются микроскопистами, которые вручную ищут зараженные паразитом эритроциты, в случае низкой паразитемии или смешанной инфекции может иметь место неверная диагностика из-за человеческой ошибки.

Ученые из Национального института прогрессивной промышленной науки и технологии (National institute of advanced industrial science and technology; Takamatsu, Япония) проводили in situ изотермическую амплификацию с формированием петель (Loop-Mediated Isothermal Amplification - LAMP) в инфицированных эритроцитах (iRBC) на обработанных гидрофильных пластинках, чтобы анализировать как можно больше iRBC на стекле. Идентификация малярийного паразита на клеточных уровнях с использованием in situ LAMP-анализа была завершена. Команда использовала свежие эритроциты здорового донора с типом крови O, которые были инфицированы P. falciparum, содержащим более 60% паразитов в кольцевой стадии, более 20% - в стадии позднего трофозоита и менее 20% - в стадии шизонта.

Суспензии эритроцитов, включающие культивированный Plasmodium falciparum, штамм 3D7, инфицированные эритроциты, диспергировали на поверхностях пластин из циклоолефинового сополимера (ЦОС), которые подвергались гидрофильной обработке реактивным ионным травлением с использованием системы SAMCO RIE (гидрофильная обработка), а затем оставались в покое в течение 10 минут, чтобы эритроциты распределились на поверхности пластины. В процессе промывки пластины средой RPMI 1640 монослои эритроцитов формировались почти на всей поверхности пластины. Затем пластина была высушена феном. Эритроциты фиксировались формалином с последующей пермеабилизацией при помощи Triton X-100. После этого была проведена амплификация рРНК гена P. falciparum с помощью реакции LAMP с дезоксиуридинтрифосфатом, меченным дигоксигенином (DIG) и конкретным набором праймеров. В результате возможно обнаружение инфицированных эритроцитов в виде флуоресцентно-позитивных клеток с анти-DIG-антителами, конъюгированными с флуоресцеином с использованием флуоресцентной микроскопии.

Авторы пришли к выводу, что их исследование показало потенциал in situ LAMP для идентификации видов плазмодия на уровне одиночных клеток на обработанных гидрофильных пластинах из циклоолефинового сополимера, что позволяет проводить высокочувствительный и точный диагноз малярии. Полученные результаты улучшат эффективность метода золотого стандарта для диагностики малярии. Исследование было опубликовано 19 июня 2018 года в журнале Malaria Journal.

Ссылки по теме:
Национальный институт прогрессивной промышленной науки и технологии


Print article

Каналы

Химия

посмотреть канал
Более высокие уровни воспалительного биомаркера растворимого рецептора-1  фактора некроза опухоли (sTNFR-1) связаны с ухудшением функции почек у здоровых взрослых людей (фото любезно предоставлено Enbrel).

Уровни воспалительного маркера связаны с ухудшением функции почек

Рецептор-1 фактора некроза опухоли (TNFR-1), который играет важную роль в дисфункции эндотелиальных клеток и воспалении,... Читать дальше

Молекулярная диагностика

посмотреть канал
Тромбоз глубоких вен (фото предоставлено Wikimedia Commons).

Предложен быстрый метод диагностирования тромбоза глубоких вен

Простой анализ крови был предложен в качестве альтернативы довольно дорогостоящей и интенсивной ультразвуковой процедуре... Читать дальше

Гематология

посмотреть канал
Система HaloPlex обеспечивает быстрый, простой и эффективный анализ представляющих интерес участков генома для большого количества образцов (фото любезно предоставлено Agilent Technologies).

Идентифицированы мутации, которые служат причиной редкого расстройства костного мозга

Ученым удалось пролить свет на вопрос, на протяжении долгих лет волнующий медицинское сообщество: какие мутации ответственны... Читать дальше

Иммунология

посмотреть канал
Микрофотография гистологического препарата печени с многочисленными кистами цестоды гидатидного эхинококка, причины кистозного эхинококкоза, или гидатидной болезни (фото любезно предоставлено Д. Кухарским и К. Кухарской/D. Kucharski, K. Kucharska).

Оценены методы диагностики эхинококкоза мочевого пузыря

Эхинококкоз мочевого пузыря (ЭМП) является одним из наиболее распространенных гельминтозных зоонозов и вызван паразитарным... Читать дальше

Патология

посмотреть канал
Диссеминированные опухолевые клетки (ДОК), выделенные с помощью двойного иммунофлюоресцентного окрашивания (AE1AE3/NR2F1 и AE1AE3/ Ki67), и корреляция между экспрессией Ki67 и NR2F1 (фото предоставлено Школой медицины Икана Медицинского центра Маунт-Синай).

Неактивные диссеминированные опухолевые клетки стратифицированы у пациентов с раком молочной железы

У пациентов с раком молочной железы может наступить рецидив и последующая смерть по причине болезни через много лет после... Читать дальше

Лаб. технология

посмотреть канал
enVision: результаты тестирования обозначаются изменением цвета и могут быть дополнительно проанализированы с помощью приложения для смартфона, что делает его привлекательным в качестве портативного диагностического устройства (фото любезно предоставлено Национальным университетом Сингапура).

Разработан низкозатратный метод диагностики с использованием наноструктур

Обнаружение нуклеиновых кислот возбудителей имеет широкое применение в диагностике и лечении инфекций. Тестирование на вирус... Читать дальше

Индустрия

посмотреть канал
Мировой рынок диагностики IVD, как ожидается, будет расти на 4% ежегодно, до 77,8 миллиардов долларов США к 2023 году (фото любезно предоставлено iStock).

Мировой рынок диагностики in vitro достигнет 77 миллиардов долларов США к 2023 году

Мировой рынок диагностики in vitro (IVD) оценивается в 65 миллиардов долларов США в 2018 году и, как ожидается, будет расти... Читать дальше
Copyright © 2000-2018 Globetech Media. All rights reserved.