Мы используем технологию cookie для понимания того, как вы пользуетесь нашим сайтом. Под этим подразумевается персонализированный контент и реклама. Для того, чтобы узнать больше - нажмите сюда. Пользуясь данным сайтом вы подтверждаете согласие с нашей политикой. Политика cookie.
Разделы Партнеры Информация LinkXpress
Вход
Реклама на сайте
GLOBETECH PUBLISHING LLC

Анализ методом петлевой изотермической амплификации обнаруживает клонорхоз в образцах человека

Редакция HospiMedica - Россия
Опубликовано 14 Mar 2018
Print article
Чувствительность анализа методом петлевой изотермической амплификации (LAMP) для обнаружения яиц Clonorchis sinensis в экскрементах, экспериментально меченных с известным количеством яиц в десятикратных серийных разведениях от 10 000 яиц (ряд 1) до одного яйца (ряд 5). Фото любезно предоставлено Медицинским исследовательским центром Сеульского национального университета.
Чувствительность анализа методом петлевой изотермической амплификации (LAMP) для обнаружения яиц Clonorchis sinensis в экскрементах, экспериментально меченных с известным количеством яиц в десятикратных серийных разведениях от 10 000 яиц (ряд 1) до одного яйца (ряд 5). Фото любезно предоставлено Медицинским исследовательским центром Сеульского национального университета.
Клонорхоз, распространенный на Дальнем Востоке, представляет серьезную проблему здравоохранения в эндемичных районах. Без лечения зараженные лица могут испытывать серьезные осложнения, такие как образование желчных камней, гнойный холангит и даже холангиокарциному.

Точный диагноз двуустки китайской (Clonorchis sinensis) важен для успешного лечения и контроля инфекции. Для диагностики клонорхоза обычно используется метод Като-Каца (KK) и/или формалин-эфирная концентрационная методика. Тем не менее обследования стула не очень эффективны, так как есть вероятность пропуска случаев заражения.

Ученые из Медицинского исследовательского центра Сеульского национального университета (Seoul National University Medical Research Center; Сеул, Корея) и их коллеги случайно выбрали из набора образцов стула жителей округа Санчхон в Корее, где клонорхоз эндемичен, а факторы риска и частота холангиокарциномы среди жителей были исследованы с 2006 года. Для каждого образца стула были проведены два мазка KK и одна полимеразная цепная реакция (ПЦР) в реальном времени. Для мазка KK 41,7 мг фекалий исследовали с помощью микроскопии и умножали результат на 24, чтобы получить представление о количестве яиц в грамме (EPG) фекалий.

Для обнаружения ДНК Clonorchis sinensis был применен анализ на основе петлевой изотермической амплификации (loop-mediated isothermal amplification - LAMP). Шесть праймеров, нацеленных на восемь местоположений гена субъединицы I цитохрома c-оксидазы C. sinensis, были разработаны для видоспецифической амплификации с использованием анализа LAMP. Амплифицированные продукты LAMP были обнаружены непосредственно либо невооруженным глазом, либо путем помещения реакционной пробирки под ультрафиолетовый (УФ) свет. Кроме того, 5,0 мкл продуктов LAMP были проанализированы электрофорезом на 2%-ном агарозном геле с последующим окрашиванием бромидом этидия и визуализацией в УФ-свете.

Анализ методом LAMP был достаточно чувствительным, чтобы обнаружить всего лишь 100 фг геномной ДНК C. sinensis, а предел обнаружения в 100 мг стула был чрезвычайно низким. Анализ оказался в высокой степени специфичным, потому что перекрестная специфичность с ДНК других гельминтов, простейших или кишечной палочки не наблюдалась. Затем анализ методом LAMP применяли к образцам человеческих фекалий, собранным из района в Корее, где был распространен клонорхоз. Используя образцы, показывающие согласованные результаты как методом Като-Каца, так и ПЦР в реальном времени в качестве стандартов, анализ методом LAMP показал 97,1% чувствительность и 100% специфичность. В образцах стула с количеством яиц более 100 на грамм фекалий чувствительность достигала 100%.

Авторы пришли к выводу, что они разработали высокочувствительный и специфичный анализ методом LAMP для обнаружения ДНК C. sinensis в образцах фекалий человека. Из-за более короткого времени реакции и лучшего визуального рассмотрения и заключения о положительности без использования сложных инструментов анализ методом LAMP будет легче применять в полевых лабораториях, чем ПЦР, в качестве мощного инструмента для более конкретной и надежной диагностики клонорхоза, тем самым улучшая как программы лечения, так и контроль. Исследование было опубликовано 9 октября 2017 года в журнале "Общественная библиотека наук о забытых тропических болезнях" (Public Library of Science Neglected Tropical Diseases).

Ссылки по теме:
Медицинский исследовательский центр Сеульского национального университета


Print article
CELLAVISION AB
Mayo Medical Laboratories

Каналы

Химия

посмотреть канал
Повышение уровня глюкозы в крови натощак увеличивает риск развития сердечно-сосудистых заболеваний (фото любезно предоставлено Diabetes Self Care).

Долгосрочный риск развития сердечно-сосудистых заболеваний стратифицируется по уровню глюкозы в крови натощак

К сердечно-сосудистым заболеваниям относятся любые заболевания сердца, сосудистые заболевания мозга или заболевания кровеносных... Читать дальше

Молекулярная диагностика

посмотреть канал
Мутационная нагрузка опухоли, определенная целенаправленным секвенированием нового поколения, предсказывает эффективность ингибиторов контрольных точек иммунного ответа для лечения рака (фото любезно предоставлено Онкологическим институтом Рутгерса).

Мутационная нагрузка опухоли прогнозирует выживание после иммунотерапии

Изучение тысяч случаев прогрессирующего рака позволяет предположить способ определения тех опухолей, которые будут с наибольшей... Читать дальше

Гематология

посмотреть канал
Жертвы с серьезными травмами, которые получают переливания единиц эритроцитарной массы, хранящихся в течение 22 дней или больше, могут столкнуться с повышенным риском смерти в течение 24 часов (фото любезно предоставлено службой патологии юго-западного Лондона /South West London Pathology/).

Переливание крови, бывшей длительное время на хранении, связано с неблагоприятными явлениями

Ведущей причиной смерти после тяжелой травмы является потеря крови. Жертвы с серьезными травмами, которые получают переливания... Читать дальше

Иммунология

посмотреть канал
ИФА-тест PicoAMH измеряет количество антимюллерового гормона (AMH) в крови (фото любезно предоставлено Ansh Labs).

Диагностический тест помогает определить менопаузальный статус

Менопауза - это период в жизни женщины, когда у нее прекращается менструальный цикл и она перестает быть фертильной.... Читать дальше

Патология

посмотреть канал
EsophaCap упакован в желатиновую капсулу, которая растворяется в желудке пациента, высвобождая губку, деликатно собирающую клетки со всей поверхности пищевода при ее извлечении. Клеточный материал исследуется с использованием цитологических, иммуногистохимических и геномных методов (фото любезно предоставлено Swallow the Sponge).

Простой и недорогой тест поможет выявлять рак пищевода

Рак пищевода уносит более 400 000 жизней по всему миру каждый год. Часто бывает, что без эффективного и надежного метода... Читать дальше

Лаб. технология

посмотреть канал
Система BD MAX - это полностью автоматизированная платформа, которая дает возможность консолидировать и стандартизировать широкий спектр молекулярных тестов, включая энтеральную панель BD Max (фото любезно предоставлено Becton Dickinson).

Энтеральная вирусная панель получает разрешение FDA

Острым вирусным гастроэнтеритом может заразиться практически любой. Возбудитель способен распространяться в условиях тесных... Читать дальше

Индустрия

посмотреть канал
Ожидается, что к концу 2024 года мировой рынок анализа мочи достигнет 1,5 миллиарда долларов США (фото любезно предоставлено Shutterstock).

Мировой рынок анализов мочи достигнет 1,5 миллиарда долларов США к 2024 году

Ожидается, что мировой рынок исследования мочи будет стабильно расти с совокупными темпами годового роста (СТГР) на уровне... Читать дальше
Copyright © 2000-2019 Globetech Media. All rights reserved.