Мы используем технологию cookie для понимания того, как вы пользуетесь нашим сайтом. Под этим подразумевается персонализированный контент и реклама. Для того, чтобы узнать больше - нажмите сюда. Пользуясь данным сайтом вы подтверждаете согласие с нашей политикой. Политика cookie.
Please note that the LabMedica website is also available in a complete English version
Разделы Партнеры Информация LinkXpress
Вход
Реклама на сайте
ELITech Group

Мобильное Приложение




Изотермическая амплификация с формированием петель идентифицирует виды малярии

Редакция HospiMedica - Россия
Опубликовано 03 Sep 2018
Print article
Схема протокола для in situ LAMP для эритроцитов, инфицированных плазмодием, на гидрофильных пластинах из циклоолефинового сополимера (фото любезно предоставлено Национальным институтом прогрессивной промышленной науки и технологии).
Схема протокола для in situ LAMP для эритроцитов, инфицированных плазмодием, на гидрофильных пластинах из циклоолефинового сополимера (фото любезно предоставлено Национальным институтом прогрессивной промышленной науки и технологии).
Малярия - инфекционное заболевание, вызываемое различными видами плазмодия, пять из которых заражают людей. Поскольку малярия, вызванная P. falciparum, является наиболее серьезной и характеризуется высокой смертностью, точный и быстрый диагноз особенно важен для эффективного лечения.

Нынешний золотой стандарт для диагностики малярии - это микроскопическое исследование окрашенных по Гимзе мазков крови. Поскольку виды паразитов идентифицируются микроскопистами, которые вручную ищут зараженные паразитом эритроциты, в случае низкой паразитемии или смешанной инфекции может иметь место неверная диагностика из-за человеческой ошибки.

Ученые из Национального института прогрессивной промышленной науки и технологии (National institute of advanced industrial science and technology; Takamatsu, Япония) проводили in situ изотермическую амплификацию с формированием петель (Loop-Mediated Isothermal Amplification - LAMP) в инфицированных эритроцитах (iRBC) на обработанных гидрофильных пластинках, чтобы анализировать как можно больше iRBC на стекле. Идентификация малярийного паразита на клеточных уровнях с использованием in situ LAMP-анализа была завершена. Команда использовала свежие эритроциты здорового донора с типом крови O, которые были инфицированы P. falciparum, содержащим более 60% паразитов в кольцевой стадии, более 20% - в стадии позднего трофозоита и менее 20% - в стадии шизонта.

Суспензии эритроцитов, включающие культивированный Plasmodium falciparum, штамм 3D7, инфицированные эритроциты, диспергировали на поверхностях пластин из циклоолефинового сополимера (ЦОС), которые подвергались гидрофильной обработке реактивным ионным травлением с использованием системы SAMCO RIE (гидрофильная обработка), а затем оставались в покое в течение 10 минут, чтобы эритроциты распределились на поверхности пластины. В процессе промывки пластины средой RPMI 1640 монослои эритроцитов формировались почти на всей поверхности пластины. Затем пластина была высушена феном. Эритроциты фиксировались формалином с последующей пермеабилизацией при помощи Triton X-100. После этого была проведена амплификация рРНК гена P. falciparum с помощью реакции LAMP с дезоксиуридинтрифосфатом, меченным дигоксигенином (DIG) и конкретным набором праймеров. В результате возможно обнаружение инфицированных эритроцитов в виде флуоресцентно-позитивных клеток с анти-DIG-антителами, конъюгированными с флуоресцеином с использованием флуоресцентной микроскопии.

Авторы пришли к выводу, что их исследование показало потенциал in situ LAMP для идентификации видов плазмодия на уровне одиночных клеток на обработанных гидрофильных пластинах из циклоолефинового сополимера, что позволяет проводить высокочувствительный и точный диагноз малярии. Полученные результаты улучшат эффективность метода золотого стандарта для диагностики малярии. Исследование было опубликовано 19 июня 2018 года в журнале Malaria Journal.

Ссылки по теме:
Национальный институт прогрессивной промышленной науки и технологии


Print article

Каналы

Химия

посмотреть канал
Схема 3D-печатного устройства для электрофореза на микрочипе, которое достаточно чувствительно для обнаружения трех сывороточных биомаркеров, связанных с преждевременными родами (фото предоставлено Университетом Бригама Янга).

Устройство, напечатанное на 3D-принтере, определяет биомаркеры, связанные с преждевременными родами

Преждевременные роды (ПВР), определяемые как роды до 37-й недели беременности, являются одним из самых распространенных осложнений... Читать дальше

Молекулярная диагностика

посмотреть канал
Гистопатология колоректальной карциномы: пример умеренно дифференцированной аденокарциномы, показывающий сложные железистые структуры в десмопластической строме (фото любезно предоставлено Медицинской школой Дэвида Геффена при Калифорнийском университете (David Geffen School of Medicine at the University of California)).

ЦоДНК предсказывает рецидив неметастатического колоректального рака

Колоректальный рак (КРР), также известный как рак кишечника и рак толстой кишки, является развитием рака толстой кишки или... Читать дальше

Гематология

посмотреть канал
Жертвы с серьезными травмами, которые получают переливания единиц эритроцитарной массы, хранящихся в течение 22 дней или больше, могут столкнуться с повышенным риском смерти в течение 24 часов (фото любезно предоставлено службой патологии юго-западного Лондона /South West London Pathology/).

Переливание крови, бывшей длительное время на хранении, связано с неблагоприятными явлениями

Ведущей причиной смерти после тяжелой травмы является потеря крови. Жертвы с серьезными травмами, которые получают переливания... Читать дальше

Иммунология

посмотреть канал
ИФА-тест PicoAMH измеряет количество антимюллерового гормона (AMH) в крови (фото любезно предоставлено Ansh Labs).

Диагностический тест помогает определить менопаузальный статус

Менопауза - это период в жизни женщины, когда у нее прекращается менструальный цикл и она перестает быть фертильной.... Читать дальше

Патология

посмотреть канал
Лимфатический узел с почти полной заменой метастатической меланомой. Коричневый пигмент является очаговым отложением меланина (фото любезно предоставлено доктором медицины Габриэлем Капонетти (Gabriel Caponetti)).

Анализ крови определяет эффективность лечения агрессивного рака

Анализы крови, отслеживающие количество опухолевых ДНК, могут определить, насколько хорошо проходит лечение у пациентов с... Читать дальше

Лаб. технология

посмотреть канал
Схематическое изображение чипа µLAS с двумя независимыми каналами, приводимыми в действие одинаковым давлением и напряжением. Каждый канал содержит область воронки, которая функционирует для разделения и концентрации ДНК (фото любезно предоставлено Университетом Лозанны).

Генетические методы позволяют быстро диагностировать болезнь Хантингтона

Люди с болезнью Хантингтона страдают от резких движений тела и снижения умственных способностей. Состояние обычно приводит... Читать дальше

Индустрия

посмотреть канал
По прогнозам специалистов, мировой рынок диагностики in vitro будет расти в период между 2017 и 2025 годами и к концу 2025 года достигнет почти 90 миллиардов долларов США (фото любезно предоставлено iStock).

К 2025 году мировой рынок диагностики in vitro достигнет 89 миллиардов долларов США

Мировой рынок диагностики in vitro был оценен в 55,00 миллиардов долларов США в 2016 году и, согласно прогнозам, будет расти... Читать дальше
Copyright © 2000-2019 Globetech Media. All rights reserved.