Мы используем технологию cookie для понимания того, как вы пользуетесь нашим сайтом. Под этим подразумевается персонализированный контент и реклама. Для того, чтобы узнать больше - нажмите сюда. Пользуясь данным сайтом вы подтверждаете согласие с нашей политикой. Политика cookie.
Разделы Партнеры Информация LinkXpress
Вход
Реклама на сайте
SIGMA ALDRICH CORP.

Инструмент на основе магнитных наночастиц поможет обнаруживать микроРНК

Редакция HospiMedica - Россия
Опубликовано 24 Sep 2018
Print article
Гибридизация нуклеиновой кислоты на электрически реконфигурируемой сети из магнитных наночастиц с золотым покрытием позволяет обнаруживать микроРНК в крови (фото любезно предоставлено Университетом Нового Южного Уэльса).
Гибридизация нуклеиновой кислоты на электрически реконфигурируемой сети из магнитных наночастиц с золотым покрытием позволяет обнаруживать микроРНК в крови (фото любезно предоставлено Университетом Нового Южного Уэльса).
Разработан метод на основе магнитных наночастиц для непосредственного обнаружения микроРНК в необработанных образцах цельной крови примерно в течение тридцати минут. В настоящее время ученые используют количественную полимеразную цепную реакцию с обратной транскриптазой (qRT-PCR) для профилирования miRNA из-за ее обычно высокой специфичности и чувствительности.

Хотя qRT-PCR дает достоверные результаты, ученые отметили, что она не обнаруживает микроРНК непосредственно в цельной крови. Вместо этого приходится проводить длительный процесс, в котором необходимо изолировать и очищать РНК, а затем синтезировать комплементарную ДНК для измерения экспрессии микроРНК. Первое заболевание человека, которое, как известно, связано с дерегуляцией микроРНК, это хронический лимфоцитарный лейкоз.

Ученые из Университета Нового Южного Уэльса (University of New South Wales; Сидней, Австралия) модифицировали поверхность покрытых золотом магнитных наночастиц (Au@MNP) с зондом из ДНК-последовательности, комплементарной к miR-21, и пометили ее синей окислительно-восстановительной меткой. Группа добавила сеть с избыточным количеством модифицированных Au@MNP с помощью ДНК-зонда (DNA-Au@NMP) к раствору аналита. Через 30 минут команда магнитосепарировала Au@MNP из раствора и смыла негибридизованные последовательности. Затем Au@MNP были собраны на поверхности золотого микроэлектрода с использованием магнита. После этого магнит был удален и применены 10 циклов вольтамперометрии с прямоугольным сигналом от 200 до 500 мегавольт, с амплитудой импульса 20 мегавольт и частотой 2 герц. Для измерения количества аналита команда использовала устойчивые максимальные токи, полученные до и после гибридизации.

Чтобы проверить предел обнаружения электрохимического инструмента и диапазон его датчика, команда подготовила различные концентрации miR-21 в фосфатно-солевом буферном растворе (phosphate buffered saline - PBS), неразбавленной человеческой сыворотке или 50% цельной крови человека. Группа оценила изменение тока после 30 минут воздействия на растворы miR-21 в диапазоне концентраций от 10 аттомолей до 1 наномоля. Использование электрохимического инструмента было проверено для анализа уровней miR-21 в пуле других последовательностей РНК из общей РНК, экстрагированной из клеток рака легких человека (A459) и экзосом. После обработки образцов ингибитором miR-21 команда по-прежнему обнаруживала уровни miR-21 в экзосомах, которые были в восемь раз ниже, чем 0,4 в их родительских клетках.

Используя электрохимический датчик на основе DNA-Au@MNP, команда обнаружила, что концентрация молекул miR-21 в случаях быстроразвивающегося рака выше, чем концентрация в группе "без контроля". Группа также отметила, что электрохимический анализ имеет меньшую изменчивость, чем qRT-PCR. Доктор философии Джон Гудинг (John Gooding), профессор химии и ведущий автор, заявил: "Этот инструмент был бы особенно полезен для низких уровней определенных белков и молекул, поскольку мы могли бы потенциально не только диагностировать состояние пациента, но и наблюдать за эффективностью лечения или потенциальным рецидивом такого заболевания, как рак". Исследование было опубликовано 27 августа 2018 года в журнале Nature Nanotechnology.

Ссылки по теме:
Университет Нового Южного Уэльса


Print article

Каналы

Химия

посмотреть канал
Новое исследование показывает, что ожирение, которое влияет на печень, может сыграть определенную роль в развитии болезни Альцгеймера и деменции в отдаленном будущем (фото предоставлено Deposit Photos).

На риск развития болезни Альцгеймера влияет состояние печени и диета

Сниженные уровни плазмалогенов имеют связь с повышенным риском болезни Альцгеймера. Плазмалогены вырабатываются в печени... Читать дальше

Молекулярная диагностика

посмотреть канал
Тромбоз глубоких вен (фото предоставлено Wikimedia Commons).

Предложен быстрый метод диагностирования тромбоза глубоких вен

Простой анализ крови был предложен в качестве альтернативы довольно дорогостоящей и интенсивной ультразвуковой процедуре... Читать дальше

Гематология

посмотреть канал
Мазок крови у пациента с острым миелоидным лейкозом (фото любезно предоставлено Торонтским университетом).

Тест ДНК предсказывает риск рецидива лейкоза

Острый миелоидный лейкоз (ОМЛ) является наиболее распространенным типом лейкемии у взрослых и составляет около четверти всех случаев.... Читать дальше

Иммунология

посмотреть канал
Принцип действия недорогой платформы Seq-Well для секвенирования РНК одиночных клеток (фото любезно предоставлено Shalek Lab).

Анализ полипов носовой полости позволяет сделать предположение о механизмах воспаления

Аллергическое воспаление может развиваться от устойчивой активации иммунитета 2-го типа в верхних дыхательных путях, что... Читать дальше

Микробиология

посмотреть канал
Флуоресцентный проточный цитометр-анализатор мочи UF-5000 (фото любезно предоставлено Sysmex).

Анализаторы флуоресценции оценены на диагностику инфекции мочевых путей

Инфекции мочевых путей (ИМП) являются одними из наиболее частых инфекций как у госпитализированных, так и у амбулаторных больных.... Читать дальше

Патология

посмотреть канал
Набор ELISA для определения концентрации молекулы повреждения почек-1 (Kim1). Фото предоставлено Enzo Life Sciences.

Анализ крови поможет раньше выявлять рак почки

Почечно-клеточный рак (ПКР) можно вылечить с помощью хирургического вмешательства, если заболевание будет диагностировано... Читать дальше

Индустрия

посмотреть канал
Ожидается, что к 2028 году рынок процессоров вестерн-блоттинга вырастет с 200 до 329 миллионов долларов США (фото любезно предоставлено Next Advance).

Рынок процессоров вестерн-блоттинга достигнет 329 млн долларов США к 2028 году

По прогнозам специалистов, рынок процессоров вестерн-блоттинга вырастет с совокупными темпами годового роста на уровне 5,1%,... Читать дальше
Copyright © 2000-2018 Globetech Media. All rights reserved.